Выделение митохондрий из сердца крыс
Среда выделения (150 мл, рН 7.4): сахароза 70 мМ; маннитол 210 мМ; хепес 10 мМ; ЭГТА 2 мМ. Среду разделяли на три части. В одну (10 мл) добавляли 1 мг протеазы (непосредственно перед выделением). В другую (70 мл) - добавляли 140 мг БСА. В третью (70 мл) ничего не добавляли.
Все процедуры проводили при 4 °С.
Сердце помещали в предварительно охлажденный физраствор и взвешивали. Затем клали сердце в среду с протеазой на 10 минут, измельчая сердце ножницами. Через 10 минут часть жидкости сверху сливали, чтобы удалить частички жира и связки. Далее разводили средой с альбумином в 9 раз и гомогенизировали.
Гомогенат центрифугировали пять минут при 650g (осаждаются ядра и обрывки мембраны).
Супернатант центрифугировали 10 мин при 8000g.
Осадок ресуспендировали в среде без альбумина, центрифугировали 10 минут при 8000g.
Осадок вновь ресуспендировали в среде без альбумина из расчета 0.1 мл среды на 1г ткани сердца и ставили в лед.
Это интересно:
Редкие рукокрылые Липецкой области. Ночница Наттерера.
Семейство:
Обыкновенные летучие мыши.
Статус
– вид, имеющий в области низкую численность, достаточной информации о котором в настоящее время нет.
Распространение.
Современных сведений о распространении в области нет. Впервые обнаруже ...
Получение чистых культур грибов
Чистые культуру базидиомицетов могут быть выделены из плодовых тел базидиоспор, путем их проращивания из корней микоризиообразующих растений или же почвы, древесины и других субстратов, являющихся средой обитания этих грибов. Наиболее про ...
Эволюция
Эволюция - это процесс изменения, развития в природе и обществе. Такое понятие является очень общим. В физических внешне замкнутых системах эволюция во времени приводит к равновесному состоянию. Ему отвечает максимальное значение энтропии ...